Como Reconstituir Péptidos de Investigação Liofilizados

Tempo estimado: 15 minutos | Apenas para fins de investigação

A reconstituição de péptidos liofilizados é um procedimento laboratorial fundamental que deve ser executado corretamente para preservar a integridade e a bioatividade do composto. Os péptidos liofilizados (secos por congelação) são enviados sob a forma de um pó estável e devem ser dissolvidos num solvente adequado antes de serem utilizados em aplicações de investigação. Este guia descreve o protocolo de reconstituição padrão com água bacteriostática, que contém 0,9% de álcool benzílico para inibir o crescimento microbiano e prolongar o tempo de vida útil da solução reconstituída.

Materiais Necessários

Frasco de péptido liofilizado (por exemplo, BPC-157, TB-500, ou qualquer péptido de investigação)
Água bacteriostática 30ml
Seringa estéril com agulha
Toalhetes de álcool

Instruções Passo a Passo

Reúna os materiais. Antes de começar, certifique-se de que tem à mão todo o material necessário: o frasco de péptido liofilizado, a água bacteriostática, uma seringa estéril com uma agulha de dimensão adequada e toalhetes de álcool. Trabalhar num ambiente limpo é essencial para evitar a contaminação.
Limpe as tampas dos frascos com um toalhete de álcool. Passe um toalhete de álcool novo sobre a tampa de borracha do frasco do péptido e do frasco de água bacteriostática. Deixe o álcool evaporar completamente antes de prosseguir. Este passo minimiza o risco de introduzir contaminantes na solução.
Aspire o volume pretendido de água bacteriostática para a seringa. A quantidade de solvente que utiliza determina a concentração final do péptido reconstituído. Por exemplo, adicionar 2ml de água a um frasco de 5mg resulta numa concentração de 2.5mg/ml. Consulte o seu protocolo de investigação para a concentração adequada.
Introduza a agulha através da tampa de borracha do frasco do péptido num ângulo de 45 graus. Introduzir em ângulo reduz a probabilidade de cortar a tampa de borracha, o que poderia introduzir pequenas partículas no frasco. Perfure de forma lenta e firme.
Injete lentamente a água contra a parede de vidro do frasco. Dirija o jato de água bacteriostática contra a parede interior do frasco, deixando-a escorrer suavemente sobre o pó liofilizado. NÃO projete a água diretamente sobre o pó, pois a força pode danificar a estrutura do péptido e reduzir a bioatividade.
Rode suavemente o frasco até o pó estar totalmente dissolvido. Utilize um movimento lento e circular do pulso para rodar o líquido no interior do frasco. O pó deverá dissolver-se em um a dois minutos, produzindo uma solução transparente e incolor. NÃO agite o frasco — a agitação vigorosa pode causar a degradação do péptido por desnaturação e formação de espuma.
Rotule o frasco com a data de reconstituição e o nome do péptido. Uma rotulagem correta evita confusões entre compostos e permite-lhe controlar o prazo de validade da solução reconstituída. Inclua a concentração caso prepare várias diluições.
Conserve a solução reconstituída no frigorífico (2 a 8 graus Celsius). Os péptidos reconstituídos devem ser mantidos refrigerados e utilizados no prazo de 30 dias para uma estabilidade ótima. Para orientações sobre conservação prolongada, consulte o nosso guia de conservação de péptidos.

Notas Importantes

Nunca utilize água estéril comum para a reconstituição se pretender utilizar o péptido ao longo de várias sessões. A água bacteriostática contém um conservante que impede o crescimento bacteriano.
Se, após a reconstituição, a solução apresentar aspeto turvo ou contiver partículas visíveis, não a utilize. Isto pode indicar degradação ou contaminação.
Diferentes péptidos podem exigir diferentes solventes (por exemplo, ácido acético para determinados péptidos hidrofóbicos). Verifique sempre as orientações de reconstituição do fabricante.
Todos os péptidos Pepspan são enviados com um Certificado de Análise que atesta a pureza e a identidade.

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Aviso de Investigação

Este guia é fornecido apenas para fins de investigação. Os produtos Pepspan destinam-se a uso laboratorial em investigação. Não são medicamentos, alimentos, cosméticos nem suplementos alimentares. Não estão aprovados para uso humano ou veterinário por qualquer entidade reguladora. Ao utilizar esta informação, confirma que é um investigador qualificado e que quaisquer produtos serão utilizados exclusivamente para fins legítimos de investigação científica. Todo o manuseamento deve respeitar a legislação local e os protocolos de segurança institucionais.